PCR for hepatitis C er en obligatorisk analyse, når man undersøger en patient med symptomer på leverskade. Undersøgelsen er ordineret for at bekræfte diagnosen og opnå den mest komplette information om sygdommens årsagsmiddel, aktiviteten af ​​virusinfektionen. Resultaterne tjener som basis for ordination af antiviral terapi, bestemmelse af varighed og evaluering af dens effektivitet..

Diagnostik ved anvendelse af polymerasekædereaktionsteknikken er blevet udbredt relativt for nylig. Forskning om dette emne er blevet gennemført siden midten af ​​1970'erne. Men de første publikationer om muligheden for at bruge PCR i praktisk medicin dukkede først op i midten af ​​1980'erne..

  • Typer af PCR
  • Indikationer for testen
  • Hvor skal man tage?
  • Regler for bloddonation
  • Afkodning af resultaterne
  • Fordele ved PCR-diagnostik
  • Prisen

Når de forklarer, hvad PCR er, lægger lægerne vægt på, at dette er den mest pålidelige og pålidelige analyse for hepatitis C. Denne test tillader ikke kun at identificere virussens RNA-partikler, men også at etablere dens koncentration (angiver aktiviteten af ​​den infektiøse proces) og genotype. De opnåede resultater spiller en nøglerolle i bestemmelsen af ​​taktikken og skemaet for yderligere terapi..

Hvad er essensen af ​​at iscenesætte en reaktion? Ved hjælp af visse biologisk aktive stoffer opnås en stigning i antallet af RNA-partikler af virussen i et lille volumen blod. Derefter bestemmes dele af genomet ved forskellige fysisk-kemiske metoder.

PCR udføres ved hjælp af flere komponenter:

  • Primer. Dette er en kunstigt syntetiseret forbindelse, hvor nukleotidsekvensen er fuldstændig identisk med en specifik region af virussets RNA, som ikke gennemgår mutationer og ændringer afhængigt af genotypen. Bestemmelse af RNA af hepatitis C-virus udføres under anvendelse af en strengt specifik primer.
  • RNA-polymerase. Et enzym karakteriseret ved stabilitet og strukturel stabilitet på baggrund af temperaturændringer, der er nødvendige for den korrekte forløb af en kemisk reaktion. Giver konstruktion af en RNA-kæde i et af PCR-stadierne.
  • Proteinblanding. For at opbygge yderligere sektioner af RNA er der brug for "byggemateriale", som visse forbindelser med proteinstrukturen tilsættes til den biologiske prøve.
  • Buffer. Blanding, der opretholder det optimale pH-niveau for polymerasekædereaktionen.
  • En prøve af biologisk materiale, der mistænkes for at indeholde en HCV (Hepatitis C Virus) RNA-prøve.

I nogle metoder til iscenesættelse af PCR anvendes der yderligere RNA-prober og andre interne kontroller, som bruges som kontrolprøver, når resultater identificeres.

Selve processen med at øge regioner af viralt RNA ved hjælp af en matrix kaldes amplifikation. Reaktionen fortsætter i flere faser:

  1. Denaturerende. Processen med at "afvikle" RNA-tråde tilvejebringes ved at hæve temperaturen til et bestemt niveau.
  2. Annealing. Efter at temperaturen er reduceret til de krævede værdier, fastgøres primere til RNA. Dette trin er kun muligt, hvis de ønskede virale partikler er til stede i blodprøven..
  3. Direkte syntese af virale RNA-regioner med deltagelse af enzymer.

De anførte cyklusser af PCR-iscenesættelse gentages adskillige dusin gange, hvilket giver en multipel stigning i antallet af RNA-regioner i det hepatitis C-forårsagende middel på niveauet bestemt ved laboratoriemetoder.

Blodprøven fremstilles korrekt inden testning. Det indeholdte RNA adsorberes på en bærerpuffer, vaskes derefter af og anvendes til at initiere polymerasekædereaktionen.

Påvisningen af ​​resultaterne udføres enten ved elektroforese (vandret eller lodret) eller ved hybridisering. Metoden til afkodning af resultaterne af reaktionen vælges ud fra målene for undersøgelsen (simpelthen identificering af RNA eller bestemmelse af dens omtrentlige mængde).

PCR - den mest nøjagtige blodprøve for hepatitis C

Listen over foreslåede undersøgelser for HCV indeholder flere emner, der adskiller sig i omkostninger, parathed og implementeringsmetode..

Hvis vi henviser til protokollerne fra Verdenssundhedsorganisationen (WHO), omfatter proceduren til diagnosticering af en infektion flere sekventielle stadier..

Til at begynde med skal du leje:

  • generel analyse af blod og urin
  • blodbiokemi;
  • forskning i glukoseindhold (strengt på tom mave)
  • HIV-test;
  • fluorografi;
  • immunogram (hvis du har mistanke om tilstedeværelsen af ​​autoimmune patologier).

Hvis parametrene for den biokemiske blodprøve afviger fra den fysiologiske norm, ordineres patienten en test baseret på påvisning af specifikke antistoffer produceret ved kontakt med virussen med blod (ELISA).

Men en sådan blodprøve for hepatitis C har en betydelig ulempe. Processen med antistofsyntese afhænger af funktionen og produktionen af ​​immunkompetente celler. Kroppens individuelle egenskaber kan forårsage både en falsk negativ og en falsk positiv reaktion..

Før lægen ordinerer en ELISA-test, fortæller lægen patienten om en mulig fejl, hvilket rejser et svarspørgsmål: "Hvilken blodprøve viser hepatitis C med en minimal risiko for at få forkerte resultater?" For at bekræfte eller afkræfte diagnosen er den mest nøjagtige laboratorietest realtids PCR.

Yderligere handlingstaktik afhænger af, hvad forskningen viser. Hvis diagnosen bekræftes, ordineres patienten straks hepatoprotektorer, advaret om vigtigheden af ​​korrekt ernæring og en sund livsstil. Men målrettet terapi er umulig uden at bestemme viral belastning og hepatitis C-genotype..

Nogle lægemidler kan fremkalde en forværring af hepatitis B. Derfor, for at udelukke komplikationer, er der desuden ordineret tests for HBsAg. HCV behandles kun efter et negativt testresultat.

Arter: Kvalitativ, kvantitativ og genotypebestemmelse

I den indledende diagnose af hepatitis C bestemmes titeren af ​​de producerede antistoffer ved den serologiske metode. Dette resultat viser nogenlunde aktiviteten af ​​den patologiske proces. Men lægen kan kun få de mest nøjagtige oplysninger efter at have studeret PCR-dataene.

I øjeblikket udføres analysen i næsten alle laboratorier ved hjælp af en ultrafølsom metode. Således er diagnosen HCV mulig inden for 10-14 dage efter infektion, sjældnere - efter 2,5-3 uger. Afhængig af de mål, der forfølges under undersøgelsen, ordinerer lægen en bestemt type test.

Der er følgende typer PCR:

  1. Kvalitet. Ved ordination af diagnostiske tests har patienterne spørgsmålet om, hvad denne forskningsmetode viser. Kvalitativ analyse ved PCR-metode er en meget følsom test, der bestemmer tilstedeværelsen af ​​virus-RNA i blodet med en minimal koncentration. Typisk udføres denne form for polymerasekædereaktion ved hjælp af omvendt transkriptionsteknologi. Dette er en af ​​de få PCR-metoder, hvor RNA kan bruges som et mål.
  2. Kvantitativ. Hepatitis C-kvantificering kan bestemme det nøjagtige niveau af HCV-RNA i blodet. Forskning er kun mulig på en måde - realtidsmetoden. Under forberedelsen af ​​materialet til PCR tilsættes et farvestof til prøven. Efter hver amplifikationscyklus udføres en automatiseret kvantitativ undersøgelse i realtid. Teknikken udføres ofte i kombination med omvendt transkription. Det er således muligt at kvalitativt bestemme det lille antal RNA-kopier af virussen. Det giver mening at fastslå niveauet af HCV RNA kvantitativt, hvis der opnås et positivt resultat af kvalitativ PCR..
  3. Genotypebestemmelse. Analysen udføres i den sidste fase af diagnoseprocessen. Undersøgelsens princip er baseret på forskellen i nukleotidsekvensen, der adskiller en genotype af hepatitis C-virus fra en anden. Normalt udføres analysen ved hjælp af multi-primer (multiplex) PCR.

Hvis der mistænkes en virusbærer, er det nødvendigt at udføre PCR af høj kvalitet. Hvis resultatet er negativt, er personen sandsynligvis sund. Men for fuldstændigt at udelukke infektion anbefales det at gentage undersøgelsen efter 7-10 dage. Hvis virusets RNA detekteres, udføres yderligere test (kvantitativ og genotypebestemmelse).

Indikationer for en laboratorietest

Den vigtigste indikation for donering af blod til hepatitis C ved hjælp af polymerasekædereaktionsmetoden er et positivt enzymimmunoanalyse (uanset type: Total, differentieret test for IgG og IgM).

Derudover skal du kontrollere:

  • under graviditet (testen udføres to gange - i første trimester og 7-10 uger før fødslen);
  • når man arbejder med en øget risiko for infektion (sygeplejersker, laboratorieassistenter, ansatte i donorcentre, kosmetologer osv.);
  • med promiskuøs samleje og ubeskyttet kontakt med en ukendt person
  • på baggrund af hiv, kræft, indtagelse af visse medikamenter osv.;
  • patienter, der er afhængige af intravenøse lægemidler;
  • med konstant udførelse af invasive diagnostiske eller terapeutiske procedurer;
  • med en blodtransfusion udført før 1992 (tidligere var der ingen pålidelige måder at kontrollere donorbiologisk materiale for tilstedeværelse af en virus).
  • når et åbent sår kommer i kontakt med andres blod, ikke-steriliserede medicinske instrumenter.

Forekomsten vokser hvert år. Derfor, til tidlig påvisning af infektion, anbefales laboratorietest for HCV at tages en gang om året..

Hvor skal man blive testet?

Ved henvendelse til klinikken har patienten ret til gratis test. Men først tager de en ELISA-test. Og kun med et positivt eller tvivlsomt resultat vises en PCR-undersøgelse. Derfor kan en hurtig diagnose stilles ved at kontakte et betalt laboratorium, hvor du kan donere blod til PCR på et passende tidspunkt for patienten. Samtidig anbefales det straks at kontrollere indikatorerne for leverenzymer, standard kliniske blodparametre.

Undersøgelsen af ​​blod ved PCR er som regel tilgængelig i næsten ethvert laboratorium. Hvis blodopsamlingsstedet ikke er udstyret med det rigtige udstyr, transporteres det biologiske materiale til forskning i overensstemmelse med temperaturregimet og andre forhold. PCR i klinikken er kun mulig efter andre undersøgelser, hvis resultater indirekte indikerer tilstedeværelsen af ​​hepatitis C.

Sådan doneres blod korrekt

Inden du donerer blod til påvisning af en mulig virus, skal du følge en række regler for forberedelse til analysen..

De vigtigste aspekter er angivet i notatet:

  1. I 5-7 dage skal du stoppe med at indtage fede, stegte fødevarer, alkohol. Generelt anbefaler læger at overholde ernæringsreglerne for diæt nummer 5.
  2. Spis ikke 12-14 timer før undersøgelsen. Du kan kun drikke vand.
  3. Det er bedre at donere blod om morgenen..
  4. Ryg ikke før proceduren.

Du bør også advare lægen om medicin, der er taget, mulige helbredsproblemer, kroniske sygdomme..

Blod trækkes fra en vene. Efter afslutningen af ​​proceduren forsegler sygeplejersken punkteringsstedet med et sterilt gips, advarer om behovet for at bøje armen og holde den i denne position i 10-15 minutter. Ellers er sandsynligheden for et smertefuldt hæmatom høj..

Hvor lang tid tager forskningen?

Hvor meget analyse der foretages afhænger af laboratoriet. Den gennemsnitlige leveringstid varierer fra 1-3 dage. Nogle klinikker leverer en betalt service til hurtig PCR-test, men tiden er begrænset af medicinsk udstyrs muligheder..

I klinikken kan resultaterne overføres til lægen inden for 7-10 dage. Dette er forbundet med en stor tilstrømning af patienter. Samtidig opbevares biologisk materiale i overensstemmelse med alle krav.

Afkodning af resultaterne

Afkodning af PCR af høj kvalitet er som regel ikke vanskelig. Men for at undgå fejlfortolkning med formularen modtaget fra laboratoriet, skal du konsultere en læge. Indstillingerne, som betyder denne eller den slags PCR, vises i tabellen.

Negativt: personen er sund, eller koncentrationen af ​​viralt RNA i blodet er for lav til påvisning.

Positivt: personen er inficeret

Udføres, hvis virus-RNA detekteres ved en kvalitativ forskningsmetode.

Afhængig af de opnåede testresultater bestemmes virusbelastningsniveauet

Udført med hepatitis C, bekræftet af andre forskningsmetoder.

Analysen giver dig mulighed for at etablere den nøjagtige genotype af patologiens patogen

Men ofte opstår der en situation, hvor ELISA for hepatitis C er positiv, og PCR er negativ. Kun en læge kan dechifrere sådanne testresultater..

Sådanne data er dog mulige i følgende tilfælde:

  • graviditet;
  • overført i akut form hepatitis C;
  • HCV-behandling afsluttet
  • tilstedeværelsen af ​​infektioner, der øger sandsynligheden for et falsk-positivt ELISA-resultat.

Kun polymerasekædereaktionen viser den nøjagtige tilstedeværelse af en virusinfektion i kroppen. På baggrund af negativ PCR indikerer en positiv ELISA i de fleste tilfælde, at personen ikke er inficeret. Men lægen skal bestemme den nøjagtige årsag til det falsk positive resultat..

Kvalitativ analyse

En kvalitativ PCR-analyse for hepatitis C bekræfter tilstedeværelsen af ​​patogenet i blodet. Hvis virusets RNA ikke opdages, er personen sund. Men hvis der er mistanke om en infektion, anbefales det at gennemgå undersøgelsen igen. Et positivt resultat indikerer infektion. Men denne analyse tillader ikke at differentiere kronisk hepatitis C fra akut og kan ikke vise, hvor aktiv den patologiske proces er..

Kvantitativ test

Kvantitativ analyse ved hjælp af PCR udføres efter bekræftelse af diagnosen, og dens afkodning er vigtig for bestemmelse af behandlingstaktik. Afhængig af koncentrationen af ​​partikler af det forårsagende middel til hepatitis C skelnes der adskillige grader af virusbelastning: medium, høj og lav. Jo højere indikatoren er, jo mere alvorlig er infektionen, og jo vanskeligere er behandlingen. Normalt er viralt RNA fraværende i blodet.

Genotypebestemmelse

Mange laboratorier udfører genotypebestemmelse i forbindelse med kvantitativ PCR, hvilket sparer penge. En sådan undersøgelse udføres kun en gang, før behandlingen påbegyndes. Normalt udføres analyse for en af ​​de fire mest almindelige genotyper (1, 2, 3 eller 4). HCV-undertypen bestemmes på samme tid. Genotypebestemmelse for underart 5 og 6 af hepatitis C er ikke mulig i hvert laboratorium.

Fordele ved PCR-diagnostik

Diagnostik efter PCR-metode er udbredt på grund af:

  • høj nøjagtighed (forudsat at den nyeste generation testsystemer anvendes)
  • nem prøveudtagning af biomateriale;
  • hurtige resultater (maksimalt 5 dage).

Men den største fordel ligger i undersøgelsens brede diagnostiske kapacitet. Analysen tillader ikke kun at identificere virussen, men også nøjagtigt at bestemme dens koncentration i kroppen og fastlægge infektionens genotype. Derudover er der behov for kvantitativ forskning for at vurdere effektiviteten af ​​antiviral terapi. Hovedmålet med behandlingen er at opnå testhastigheden (dvs. ikke-detekterbart niveau af HCV-RNA) ved 4, 12 eller 24 uger af det antivirale forløb og opretholde dette resultat.

Prisen

Omkostningerne ved PCR-analyse varierer efter region. Så i Moskva er priserne højere. PCR af høj kvalitet koster 600-800 rubler, kvantitativ - 2200-3000 rubler, genotypebestemmelse - fra 1000 rubler. Du kan finde ud af nøjagtigt, hvor meget en bestemt undersøgelse koster direkte i laboratoriet, på en medicinsk organisations hjemmeside eller telefonisk.

Kvalitativ analyse for hepatitis C: afkodning

Årsagen til udviklingen af ​​viral hepatitis C er infektion med et patogen, der tilhører familien Flaviviridae. Der er et langt tidsinterval mellem infektion og antistofproduktion, hvilket ikke tillader rettidig diagnose af sygdommen ved hjælp af et enzymimmunassay.

PCR-analyse for hepatitis C, biokemi, CBC, leverprøver udføres, hvis der er mistanke om en infektion. Ved polymerasekædereaktionen er det muligt at detektere virussen i blodet selv i den første uge af infektionen, hvilket er den dominerende fordel ved metoden.

Kvantitativ og kvalitativ analyse for hepatitis C og træk ved undersøgelsen, hvordan man forbereder sig, om der er fejl, afkodning - vi vil overveje detaljeret.

Hvad er polymerasekædereaktionsmetoden?

Polymerasekædereaktion er en molekylær forskningsteknik til bestemmelse af det genetiske materiale af et viralt middel fra de første dage af infektionen. Analysen er kendetegnet ved en høj grad af pålidelighed, specificitet og nøjagtighed. Takket være ham detekteres ikke kun fravær / tilstedeværelse af virussen, men også viral belastning (kvantitativ værdi), genotype.

Til undersøgelsen er det nødvendigt med patientens blod, hvor formodentlig RNA fra en virusinfektion er placeret. Under laboratorieforhold tilsættes primere til den biologiske væske - disse er kunstigt syntetiserede fragmenter af det ønskede gen af ​​kort længde. Plus RNA-polymerase - et specialiseret enzym, der multiplicerer koncentrationen af ​​det ønskede materiale.

Yderligere opvarmes og afkøles blodet med tilsætning af komponenter flere gange i en speciel enhed. Derefter kommer analysen af ​​de opnåede resultater, sammenligning med de kendte gener fra det virale middel. Baseret på dette drages en konklusion om sygdommen.

Forskellige PCR-undersøgelser

Analysen for hepatitis C PCR udføres i laboratoriet med tilsætning af de nødvendige reagenser, den har tre sorter med særpræg:

  1. Kvalitativ PCR-analyse for hepatitis C er den første fase af undersøgelsen. Gennem det påvises patogenets genetiske materiale i blodserumet.
  2. En kvantitativ undersøgelse giver dig mulighed for at estimere viral belastning - dette er indholdet af viralt materiale i 1 ml af en patients blod. Det udføres inden behandlingsforløbet og derefter efter 1-4-12 ugers behandling. Når forløbet er langt, skal undersøgelsen udføres efter 24 ugers behandling for at vurdere effektiviteten.
  3. Genotypebestemmelse. En infektiøs sygdom udvikler sig hurtigt, virussen har tendens til at mutere. Derfor er det nødvendigt at identificere genotypen på virussen.

Forskere har identificeret 7 genotyper af virussen. I Den Russiske Føderation er 1-2-3 arter meget almindelige.

Hver af genotyperne er kendetegnet ved resistens over for behandling.

For eksempel, med type 1 er effektiviteten af ​​behandlingen omkring 60%, på baggrund af 2-3 typer når indikatoren 85%.

For at finde de rigtige lægemidler, varigheden af ​​behandlingen, er det nødvendigt at identificere ikke kun infektionsfaktoren, men også koncentrationen af ​​virussen, dens genotype.

Indikationer for

Markører for hepatitis, PCR og ELISA, andre undersøgelser har visse medicinske indikationer:

  • Når en patient har en historie med HIV-infektion, AIDS.
  • Kontakt med en inficeret person, da viral hepatitis er meget smitsom.
  • Symptomer på skrumpelever - hepatomegali, en stigning i miltens størrelse, et venøst ​​mønster dukkede op på maven osv..
  • Klinik for funktionelle leversygdomme - periodisk / vedvarende smerter i højre hypokondrium, gulfarvning af huden, kvalme.
  • Høje værdier af AST og ALT i blodbiokemi.
  • Under graviditet, når leverfunktionstest er dårlige.
  • Før du starter et antiviralt forløb for at bestemme viral belastning.
  • For at overvåge effektiviteten af ​​behandlingen.
  • Efter behandling for at forhindre gentagelse af virusinfektion.

PCR udføres med en bekræftet diagnose af hepatitis B for at udelukke en blandet type leverskade.

Forberedelse til forskning og prøveudtagning

Lægen vil fortælle dig, hvordan du forbereder dig til analysen. Forberedelse anbefales til patienten for at opnå et nøjagtigt resultat. Den består af følgende anbefalinger:

  1. Analysen skal tages om morgenen på tom mave. Det er kun tilladt at drikke rent, ikke-kulsyreholdigt vand, før man tager blod. Sidste måltid - 8 timer før afhentning.
  2. Hvis du ikke kan få testen udført om morgenen, kan du gøre det om aftenen eller ved frokosttid, vigtigst af alt - 5-6 timer efter at have spist, ikke tidligere.
  3. Opgiv alkoholholdige drikkevarer, koffeinholdige drikkevarer, juice 48 timer før undersøgelsen.
  4. I 2 dage skal du følge en diæt, eksklusive alle skadelige produkter. Nogle læger mener dog, at fede, stegte fødevarer ikke påvirker nøjagtigheden af ​​PCR-testen..

Tag ikke medicin i 24 timer før medicinsk manipulation. Hvis dette ikke er muligt, skal du informere din læge. Analysen anbefales ikke at udføres umiddelbart efter ultralyd, CT, massage og andre fysioterapiprocedurer.

Blodprøvetagning sker som følger:

  • Ved hjælp af en speciel turné, der strammes på patientens underarm, stopper lægen den venøse blodgennemstrømning. Åre bliver mere synlige, hvilket gør det lettere at indsætte en nål og derefter tage blod.
  • Området af huden inden indførelsen af ​​en steril nål behandles med en alkoholholdig væske.
  • En nål indsættes i venen, hvorefter et reagensglas er fastgjort til den, hvor blodet strømmer.
  • Efter introduktionen af ​​nålen fjernes turnetten. Saml den krævede mængde blod, fjern nålen.
  • En vatpind dyppet i alkohol påføres injektionsstedet.

For at forhindre dannelse af et blå mærke ved injektionsstedet på nålen er det nødvendigt at presse vatpinden hårdt nok mod det skadede område, bøje armen og holde den i denne position i 3-4 minutter.

Hvis patienten tager medicin, der fortynder blodet (Aspirin, Warfarin), kan der være visse problemer med at stoppe blødningen.

Fordele ved PCR i forhold til andre tests

Polymerasekædereaktionsmetoden har visse fordele i forhold til andre diagnostiske teknikker..

Fordelene ved undersøgelsen er vist i tabellen:

UndersøgelsestypeMuligt resultat og tilsigtet udskrift
PCR af høj kvalitet
Kvantitativ
Genotypebestemmelse
Direkte diagnose af det forårsagende middel til patologiAndre undersøgelser giver os mulighed for at give et svar - er der et patogen i kroppen eller ej. Men ved hjælp af PCR-teknikker kan du specifikt fastslå typen af ​​viralt middel.
Undersøg specificitetPCR registrerer et unikt stykke DNA, der kun matcher en type viralt middel. Dette minimerer risikoen for fejl..
Høj grad af følsomhedDet er muligt at opdage selv en lille koncentration af virussen i blodet.
Bestemmelse af alle patogenerUnder undersøgelsen kan alle patogene stoffer påvises.
Latente infektionerUd over det virale patogen kan der påvises infektioner, der har et latent forløb, der er kendetegnet ved høj antigen aktivitet..

Når en patient får et positivt resultat, vil det betyde, at det genetiske materiale af det forårsagende middel til hepatitis er fundet i den biologiske væske. Negativ total - ingen spor af virussen.

Afkodning af resultaterne

Lægen bør dechiffrere resultaterne på baggrund af den konklusion, som patienten modtager i laboratoriet. Det er nødvendigt at analysere dataene sammen med indikatorer for biokemi, CBC, ultralyd.

Kvalitet

En kvalitativ undersøgelse vil vise tilstedeværelsen eller fraværet af det forårsagende middel til en virussygdom i det humane blod. Der kan være to muligheder - negativt (norm) eller positivt resultat.

Formularen siger undertiden: fundet eller ikke fundet.

Et positivt resultat - laboratorieassistenten identificerede det genetiske materiale af det virale middel i patientens blod, infektionen blev bekræftet. Negativ konklusion - der er ingen infektion, RNA-fragmenterne af virussen er under følsomhedsgrænserne.

Kvantitativ

Kvantitativ analyse indebærer flere muligheder for resultaterne. For nemheds skyld præsenterer vi dem i form af en tabel..

ResultatAfkodning
NegativDette er normen for en sund person. Dette betyder, at der ikke er viral hepatitis-RNA i det undersøgte biologiske materiale, eller at indholdet er mindre end tærsklerne for følsomhed.
Op til 1,8 * 10 ^ 2 IE / mlAngiver, at RNA-indholdet er mindre end kvantificeringsområdet. Dette resultat skal fortolkes omhyggeligt, fordi det betragtes som kontroversielt. Derudover udføres andre undersøgelser til efterfølgende sammenligning. Gentag også PCR-testen.
Op til 8 * 10 ^ 5 IE / mlLav viral belastning. Som regel betyder dette resultat, at behandlingen er effektiv..
Fra 8 * 10 ^ 5 IE / mlHøj viral belastning. Behandling er straks påkrævet (hvis den ikke udføres), eller korrektion af medicin er nødvendig.
2,4 * 10 ^ 7 IE / mlRNA er større end det øvre kvantificeringsmaksimum. På denne baggrund vurderes virusbelastningen ikke. En anden undersøgelse med en fortynding af en biologisk væskeprøve er påkrævet.

Genotypebestemmelse

Resultat - ribonukleinsyre af en specifik genotype blev fundet. Derudover angives genotypen og undertypen, laboratorieassistenten koder konklusionen med latinske bogstaver og tal. For eksempel genotype 1a. I alt skelnes der mellem 7 genotyper, 67 undertyper.

Resultat - Der blev påvist hepatitis C-virus-RNA - dette er DNA af en sjælden genotype, der ikke kan tilskrives almindelige virale midler, derfor kræves yderligere diagnostik.

Når PCR er negativ, og ELISA er positiv

Dekrypterer konklusionen af ​​en laboratorieassistent hepatolog eller specialist i infektionssygdomme. Der er altid en risiko for at få et falsk negativt eller falsk positivt resultat. Nogle gange sker det, at PCR er negativ, og ELISA er positiv.

Det betyder, at der i øjeblikket ikke er nogen virus i patientens blod, men han har lidt en akut sygdom. Det antages generelt, at ELISA viser antistoffer, der produceres af immunsystemet efter invasionen af ​​patogenet i kroppen..

ELISA er i sammenligning med PCR kendetegnet ved lav pålidelighed og pålidelighed, derfor bruges den som en primær screening. Ved diagnosticering af viral hepatitis er polymerasekædereaktion uundværlig.

Omkostningerne ved testning af hepatitis C

Du kan tage tests på det hospital, hvor patienten observeres, hvis der er et laboratorium der, eller kontakte et privat center mod et gebyr.

På kort tid kan du få et resultat i laboratoriecentre som Gemotest, Invitro, Helix.

Forskningsomkostninger afhængigt af laboratoriet:

Navn på laboratorietjenestePrispolitik
Helix· Omkostningerne ved prøveudtagning af biologisk materiale - 170 rubler.

Kvalitativ + kvantitativ forskning efter PCR-metode - 3990 rubler.

Påvisning af antistoffer mod en virussygdom - 1.500 rubler (2-3 dage).

Kontrol af virussens aktivitet inden behandlingens start - 4090 rubler.

InvitroKvantitativ påvisning af RNA af hepatitis C-virus ved PCR - 3140 rubler.

Samling af biologisk materiale (venøst ​​blod) - 199 rubler.

Viral belastningsvurdering med realtidsregistrering - 18.000 rubler.

Ultrasensitiv test af høj kvalitet - fra 3000 rubler.

Genotypebestemmelse - fra 1250 rubler.

HemotestKvantitativ forskningspris 2200 rubler.

Højkvalitetsdiagnostik fra 700 rubler.

Bestemmelse af patogenets RNA - fra 4000 rubler.

Blodprøvetagning fra en vene omkring 150 rubler.

Undersøgelsens varighed er i gennemsnit 2-3 dage. I nogle laboratorier er der en presserende analysetjeneste, dens omkostninger er 1,5-2 gange højere. Det er også muligt at ringe til en lægespecialist for at donere blod og modtage resultaterne via e-mail eller personligt, når du kontakter laboratoriet..

PCR for hepatitis C: kvalitativ og kvantitativ blodprøve og fortolkning af resultater

Indtil 1990'erne brugte den medicinske litteratur udtrykket "parenteral non-A, non-B hepatitis" til at definere infektiøs hepatitis C. Men i 1989 blev Hepatitis C-virus (forkortelse - HCV) først isoleret, men pålidelige diagnostiske metoder, herunder PCR for hepatitis C, dukkede op meget senere..

Polymerasekædereaktion (afkodning af forkortelsen PCR) med det formål at påvise HCV-infektion er en af ​​komponenterne i generel screening, hvilket er obligatorisk for mennesker og patienter med:

  • graviditet (undersøgelsen udføres flere gange - ved registrering og i sidste trimester);
  • donation af blod og organer
  • hos modtagere før og efter transfusion / transplantation
  • arbejde forbundet med en øget risiko for infektion
  • planlægning af kirurgi og andre invasive procedurer;
  • leverskade (analysen udføres under den indledende undersøgelse);
  • udførelse af permanente hæmodialyseprocedurer;
  • samtidig HIV;
  • onkologiske sygdomme;
  • kontakt med en inficeret person.
  • Typer af blodprøver
  • Typer af PCR
  • Hvor man kan leje
  • Sådan skal du tage
  • Afkodning
  • Fordele
  • Pris

Screening anbefales til folk, der bruger stoffer, leverer sextjenester og er promiskuøse. Samtidig skal den samme eksamen videregives til deres samboere eller faste partnere. Obligatorisk analyse for HCV er indiceret til børn født af inficerede mødre.

Det forårsagende middel til selve sygdommen er en RNA-holdig virus overtrukket med en lipidmembran. Den terminale region, der består af ca. 340 nukleotidsubenheder, er "ansvarlig" for translation af genomet. Dens strukturelle struktur er ens i 90% af de forskellige HCV-undertyper. Det er ham, der er det vigtigste mål for analysen af ​​hepatitis C ved PCR.

Derudover er sammensætningen af ​​det virale genom repræsenteret af nukleare (kerne) og ikke-strukturelle (NS) regioner. Den første regulerer replikationen af ​​sygdommens årsagsmiddel, og NS sikrer hurtig penetration af virussen i en sund celle. Strukturel variabilitet bemærkes ofte på NS E2-stedet, hvilket forklarer manglen på et korrekt immunrespons hos nogle patienter, den latente udvikling af patologi og en tendens til et kronisk forløb (op til 80% af tilfældene).

På grund af den udbredte forekomst af hepatitis C udføres gratis test i mange kliniske centre. Tilvejebringelse af forskningsresultater er et obligatorisk krav for udstedelse af en hygiejnebog.

Ud over at bekræfte HCV-infektion giver moderne diagnostiske metoder os mulighed for at vurdere sværhedsgraden af ​​sygdommens forløb for at bestemme virusens genotype. Dette påvirker behandlingsregimet (valg af en kombination af lægemidler, deres dosering, administrationsvarighed) og prognosen for patologi.

Hvilken blodprøve for hepatitis C skal tages?

En blodprøve for hepatitis C kan udføres ved flere metoder, og hver af dem adskiller sig i informationsindhold og pålidelighed.

Alle metoder til diagnostisk forskning kan opdeles i flere grupper:

  1. Serologisk, der er i stand til at påvise visse antistoffer (immunglobuliner), der produceres i kroppen som reaktion på penetration af et patogen, udføres ved ELISA eller immunoblotting.
  2. Molekylær, der sigter mod bestemmelse af hepatitis C.-virusets RNA.Resultaterne af undersøgelsen viser den virologiske belastning bruges ofte til at overvåge effektiviteten af ​​terapien og gøre det muligt at bestemme HCV-genotypen, hvilket er vigtigt for udvælgelsen af ​​lægemiddelbehandling. Denne gruppe af diagnostiske tests inkluderer PCR, PCR med hybridisering-fluorescensdetektion (realtidsmetode).
  3. Genotypning ordineres til alle patienter uden undtagelse, inden de tager antivirale lægemidler. Nødvendigt til planlægning af varigheden, undertiden til valg af dosis af lægemiddelterapi.

For nylig er en analyse til bestemmelse af en patients genotype med hensyn til IL28B blevet udbredt. Ifølge kliniske studier forudsiger en sådan test den tid, der kræves for at opnå et vedvarende virologisk respons hos patienter med HCV-genotype I behandlet med første generation proteasehæmmere..

Der er i øjeblikket ingen problemer, hvor man kan donere blod til PCR eller andre tests til påvisning af HCV. Uopsættelig analyse kan udføres i et betalt laboratorium. I distriktspoliklinikker og hospitaler udføres forskningen efter først til mølle-princippet (undtagen strenge indikationer).

Patienter har ofte et spørgsmål, hvad er PCR-analyse for hepatitis C, og hvordan adskiller den sig fra andre diagnostiske metoder? Denne teknik er at reproducere flere kopier af DNA baseret på viruset. Dette er den mest nøjagtige analyse, der giver dig mulighed for at bestemme patogenens genotype og dens kvantitative indhold både i blodserum og i en biopsi af levervæv.

Diagnose af HCV-infektion inkluderer et kompleks af forskellige undersøgelser. En biokemisk blodprøve kan ikke vise infektion. Afvigelse af resultaterne (niveauet af leverenzymer, bilirubin osv.) Fra fysiologiske parametre indikerer en krænkelse af leveren, og lægens opgave er at fastslå årsagen til et sådant problem.

Til at begynde med består de en række enkle undersøgelser, der inkluderer:

  • generel blodprøve (med HCV-infektion er det muligt at ændre niveauet af leukocytter, hæmoglobin, antallet af blodlegemer og andre indikatorer);
  • biokemi (en stigning i koncentrationen af ​​leverenzymer, bilirubin indikerer sværhedsgraden af ​​leverskader);
  • test for samtidige infektioner (obligatorisk for HIV, nogle gange for nogle seksuelt overførte sygdomme).

For at vurdere det overordnede kliniske billede udsteder lægen anvisninger til urinanalyse, ultralydsundersøgelse af indre organer, røntgen eller brystfluorografi. Andre diagnostiske procedurer udføres i henhold til indikationer.

Hvilke tests for hepatitis C skal der tages for nøjagtigt at bestemme diagnosen? I overensstemmelse med WHO's anbefalinger begynder diagnosen af ​​HCV med en serologisk undersøgelse ved hjælp af ELISA-metoden (i nærværelse af udtalt abnormitet i biokemi). Hvis denne test viser et positivt resultat, er det nødvendigt med yderligere undersøgelse af patienten. Ud over PCR og generelle kliniske analyser ordineres HBS ag HCV. Nogle antivirale lægemidler kan fremkalde en forværring af hepatitis B, derfor skal denne patologi udelukkes, før behandlingen påbegyndes.

Typer af PCR-analyse for hepatitis C: kvantitativ, kvalitativ og genotypebestemmelse

Den største fordel ved PCR til HCV-bestemmelse er muligheden for tidlig diagnose (18-21 dage efter infektion). Påvisningen af ​​virusets RNA i blodet gør det muligt entydigt at fortolke de ufattelige ELISA-data. Et positivt resultat tjener som en entydig indikation til yderligere undersøgelse og recept på behandling, og et negativt resultat (i tilfælde af afvigelser fra normen for biokemiske tests) er en grund til genundersøgelse efter 3-4 uger.

Der er flere typer HCV PCR-diagnostik:

  1. Kvalitet. Hvad viser en kvalitativ PCR-test for hepatitis C? Gennemførelse af en sådan undersøgelse giver dig mulighed for at afgøre, om en person er smittet. Eksperter anbefaler at lave en prøve ved hjælp af en ultrafølsom metode (med en følsomhed for testsystemer på mindst 10-50 IE / ml). At dechifrere resultaterne er enkel - positiv indikerer infektion og progressiv spredning af virussen i kroppen, negativ - enten fraværet af sygdommen eller den ubetydelige koncentration af patogenet (det er meget muligt, at det humane immunsystem vil klare patogenet alene).
  2. Kvantitativ. Kvantitativ analyse for hepatitis C ved PCR (i modsætning til en kvalitativ test) giver dig mulighed for kvantitativt at bestemme viral belastning, det vil sige niveauet af HCV RNA i en volumetrisk enhed af blod. Resultaterne kan fortolkes på baggrund af det normale interval og patologiske værdier målt i IE / ml. En viral belastning over 75 IE / ml betragtes som positiv. Kvantitativ testning vil være negativ under 75 IE / ml.
  3. Genotypebestemmelse. En lignende analyse indsendes med en etableret diagnose af HCV-infektion for at udvikle en individuel tilgang til patienten. Det udføres ved hjælp af sekventering og omvendt hybridisering. Virusbelastningen kan ændre sig under hele sygdommen, men genotypen forbliver den samme.

Undersøgelsen ved forskellige PCR-metoder er vist på forskellige stadier af diagnose og behandling af hepatitis C. Det kvantitative gentages oftere end andre for at overvåge effektiviteten af ​​antiviral terapi.

Indikationer for forskning

De vigtigste indikationer for donation af blod til hepatitis C er:

  • graviditet (rutinemæssig screening er vist)
  • forebyggende undersøgelse af personer i fare (medicinske arbejdere, frivillige i centre for stofbehandling)
  • HIV;
  • ubeskyttet sex med en inficeret person;
  • promiskuøs sex.

I betragtning af den høje forekomst af hepatitis C anbefaler eksperter at gennemføre en profylaktisk undersøgelse for hver person. Risikoen for infektion er til stede, når du besøger et tandpleje, en negle / pedicure salon, hvor de er uærlige med hensyn til sterilisering af instrumenter osv..

En streng indikation til testning er udseendet af karakteristiske og uspecifikke symptomer på hepatitis C. De mest almindelige tegn inkluderer:

  • generel svaghed
  • langvarig subfebril tilstand i fravær af andre infektioner;
  • misfarvning af afføring og / eller urin;
  • kvalme, opkastning.

Gulhed af slimhinder og epidermal dækning er sjælden. Hos 80% af patienterne er sygdommen asymptomatisk i lang tid, den diagnosticeres ofte tilfældigt under en planlagt klinisk undersøgelse.

Hvor skal man donere blod

Det er muligt at udføre en analyse af hepatitis C ved PCR i næsten ethvert privat laboratorium eller klinik på bopælsstedet. Når det er indlagt på hospitalet, foretages undersøgelsen på et hospital i et hospital.

Fordelene ved laboratoriecentret er:

  1. Intet behov for henvisning fra en læge.
  2. Korte betingelser for forskningsafslutning. Hvor meget analyse der udføres, vil laboratorieassistenten sige, når du afgiver en ordre. Normalt er det 1-2 dage. Nogle laboratorier leverer presserende forskningstjenester mod et gebyr.
  3. Service (ingen køer, praktisk onlinebetaling, modtagelse af resultater via e-mail).
  4. Kvaliteten af ​​det udstyr, som undersøgelsen udføres på (for at udelukke en falsk positiv analyse).

Uden først at have konsulteret en læge er det imidlertid vanskeligt at bestemme, hvilken type PCR der er behov for. Du kan heller ikke selv fortolke resultaterne. Nogle laboratorier bruger forskellige skalaer til måling af viral belastning, hvilket kan forårsage fejl. Undersøgelsen med polymerasekædereaktionsmetoden er ofte en del af en omfattende undersøgelse, der inkluderer både laboratorie- og instrumenttest, som er billigere at udføre i en poliklinik under den obligatoriske lægeforsikring.

Sådan skal du tage

Resultaterne kan påvirkes af ikke at kende reglerne for, hvordan man donerer blod. Hovedmaterialet til PCR er serum. Leverbiopsiundersøgelse er informativ, men invasiv procedure er ikke egnet til rutineanalyse. Sådan doneres blod korrekt?

For at opnå pålidelige resultater skal du følge følgende anbefalinger:

  1. De donerer blod strengt på tom mave: madindtagelse er udelukket 10-12 timer før proceduren.
  2. I 2-3 dage før analysen skal du afstå fra at indtage alkohol, "tung" (fed, stegt, salt, røget) mad, krydderier.
  3. Om morgenen før undersøgelsen kan du kun drikke vand (te, kaffe er kontraindiceret).
  4. Begræns tung fysisk aktivitet om dagen.
  5. Afstå fra at ryge 10 timer før proceduren.

Blod trækkes fra en vene.

Det er nødvendigt at konsultere en læge og informere en specialist, hvis patienten tager medicin. Hvis det er muligt, bør du suspendere brugen af ​​medicin en dag før du giver blod..

Hvor meget der foretages kvalitativ og kvantitativ analyse?

Den specifikke timing for analysen af ​​HCV ved PCR afhænger af laboratoriets arbejdsbyrde og tilgængeligheden af ​​det nødvendige diagnostiske udstyr. F.eks. Hvis materiale transporteres fra et blodopsamlingssted til et laboratoriecenter, øges testtiden..

Hvor meget udføres den gennemsnitlige hepatitis C-test? De fleste diagnostiske centre sætter følgende vilkår for undersøgelsen:

  • kvalitativ definition af virussen - 1-4 dage;
  • kvantitativ påvisning af viral belastning ved PCR-metode - 1-2 dage;
  • genotypebestemmelse - 1-4 dage.

I poliklinikker kan denne periode være op til 7-10 dage. Når du udfører en undersøgelse i et privat laboratoriecenter, modtager du en kvittering med en kode, hvormed du kan downloade resultaterne. Som regel modtager patienten en besked med en meddelelse, når den er klar.

Afkodning af PCR

Laboratorietestdata gives til patienten i form af en tabel, hvor følgende parametre nødvendigvis er angivet:

  • type PCR (kvalitativ, kvantitativ eller genotypebestemmelse)
  • hvilke testresultater der blev opnået
  • referenceværdier og fortolkning af afvigelser fra normen (denne kolonne er muligvis ikke til stede på alle former for at undgå fejlagtig diagnostik og efterfølgende selvmedicinering).

Angiv også datoen for blodprøvetagning og udstedelse af resultater, koordinater og forsegling af laboratoriecentret, fuldt navn og underskrift for den læge, der gennemførte undersøgelsen.

Afkodning, dvs. hvad det opnåede resultat betyder, bør kun udføres af en kvalificeret læge.

De data, som en PCR-undersøgelse kan vise, er vist i nedenstående tabel:

Indikatorer afhænger stort set af følsomheden af ​​laboratorieudstyr

  1. Negativ (ingen gepatit C-virus-RNA-prøver).
  2. Mindre end 600 IE - lav virologisk belastning, prognosen for hepatitis C er gunstig.
  3. 600-700.000 IE - moderat virologisk belastning, krævet behandling, patienten er smitsom over for andre.
  4. Mere end 700.000 IE er en meget høj virologisk belastning, prognosen er dårlig selv under behandling, der er stor sandsynlighed for, at kronisk hepatitis C diagnosticeres.
PCR-typeBeskrivelse af de modtagne værdier
KvalitetFormularen angiver "fundet" eller "ikke fundet"
Kvantitativ
GenotypebestemmelseDet udføres, hvis tilstedeværelsen af ​​en virus i kroppen detekteres. Formularen viser den identificerede HCV-undertype

Dechifrering af resultaterne skal foretages af en kvalificeret specialist. Så nogle gange opstår der situationer, hvor ELISA for hepatitis C er positiv, og PCR er negativ. Der er flere grunde til denne uoverensstemmelse. Dette kan være en laboratoriefejl, så en af ​​undersøgelserne skal gentages efter 2-3 uger.

Nogle gange skyldes sådanne resultater latent akut HCV-infektion. ELISA registrerer tilstedeværelsen af ​​antistoffer, men faktisk er virusets RNA i kroppen enten fraværende eller detekteres ikke på grund af den ubetydelige koncentration. Under alle omstændigheder har en patient med lignende forskningsdata brug for yderligere observation og konsultation med en læge..

Kvalitativ analyse

En kvalitativ PCR-analyse er en relativt hurtig og mest nøjagtig metode til den primære diagnose af hepatitis C. Ifølge resultaterne af undersøgelsen er det muligt at bestemme, om en person er inficeret eller ej, og derefter udføre mere detaljerede laboratoriemetoder. Et falsk negativt resultat er sandsynligvis i de første 14-21 dage efter infektion, når mængden af ​​RNA af virussen er utilstrækkelig til påvisning, selv med meget følsomme testsystemer.

Et falsk positivt resultat er mulig på grund af fejlen fra laboratoriepersonalet. Nogle gange opnås sådanne data under graviditet, et aktivt forløb af onkologiske og / eller autoimmune sygdomme..

For at eliminere sandsynligheden for forkert fortolkning anbefales det at gentage den kvalitative analyse efter 3-4 uger..

Kvantitativ analyse

Kvantitativ PCR-test for hepatitis C ordineres normalt for at bestemme viræmi under antiviral terapi. Normalt, når stoffer tages, falder den virologiske belastning gradvist. Målet med behandlingen er negative eller mindst acceptable forskningsindikatorer.

Fortolkningen af ​​resultaterne afhænger af de måleenheder, der anvendes i laboratoriet, derfor angiver formularen normalt de opnåede data, referenceværdier og beskrivelser af afvigelser fra normen.

Kvantitativ PCR-analyse er nødvendig for at vurdere effektiviteten af ​​behandlingen, vælge et behandlingsregime (en kombination af flere antivirale lægemidler) og bestemme varigheden af ​​medicinindtagelsen. Undersøgelsen udføres regelmæssigt og efter afslutningen af ​​behandlingsforløbet til rettidig påvisning af tilbagefald.

Genotypebestemmelse

En af de vigtigste undersøgelser, der udføres på diagnostisk stadium og nødvendigvis inden behandlingens start, da genotypen er den vigtigste faktor, der påvirker udvælgelsen af ​​medicin.

Indtil i dag er 6 HCV-genotyper kendt (hver har sine egne undertyper), men i Rusland og europæiske lande er det overvældende flertal af patienter diagnosticeret med:

  • 1b - en af ​​de mest ugunstige med hensyn til prognose, bliver hurtigt kronisk, aggressiv over for levervæv, vanskelig at behandle;
  • 4 - dårligt "reagerer" på terapi, kræver omhyggelig udvælgelse af lægemiddelregimen;
  • 2a, 3a - vellykket behandling bemærkes i 70% af tilfældene og oftere (ved brug af moderne antivirale lægemidler).

Resten af ​​genotyperne diagnosticeres sjældnere. I modsætning til kvantitativ analyse udføres genotypebestemmelse én gang og gentages ikke under behandlingen (med undtagelse af resistente former for HCV, der ikke reagerer på terapi.

Fordele ved PCR-diagnostik

På trods af at WHO anbefaler ELISA som den vigtigste metode til påvisning af HCV-infektion, har PCR-undersøgelsen en række fordele:

  • høj nøjagtighed
  • muligheden for primær diagnose
  • evaluering af effektiviteten af ​​behandlingen ved at bestemme den virologiske belastning;
  • nøjagtig bestemmelse af virusets genotype, som bestemmer taktikken til yderligere behandling;
  • overkommelige omkostninger.

Der er blodprøvetagningspunkter til forskning i enhver by, hvilket desuden letter diagnostik og gør leveringen af ​​tests tilgængelige for hver patient.

Hvor meget koster analysen

Omkostningerne ved en PCR-test for hepatitis C afhænger af en række faktorer:

  1. Prispolitik for laboratoriecentret og dets placering (for eksempel i Moskva er sådanne tjenester dyrere).
  2. En slags forskning (prisen for kvalitativ, kvantitativ analyse og genotypebestemmelse er forskellig).
  3. Færdiggørelsesbetingelser (et antal laboratorier tilbyder at betale et bestemt beløb for hastende resultater).

Du kan finde ud af, hvor meget PCR for hepatitis C koster enten telefonisk eller på laboratoriets websted.

Den gennemsnitlige pris i Rusland er:

  • kvalitativ bestemmelse af virusets RNA - 700-1000 rubler og op til 3000 rubler ved hjælp af ultrafølsomme testsystemer;
  • genotypebestemmelse - 1000-1200 rubler (i kombination med kvantitativ bestemmelse - op til 4000 rubler);
  • kvantitativ bestemmelse af virologisk belastning - 2300-3000 rubler.

I poliklinikken på bopælsstedet udføres sådanne undersøgelser gratis (hvis du har en obligatorisk lægeforsikring). Men laboratorieassistenten skal forelægges en henvisning fra den behandlende læge.