I betragtning af det asymptomatiske forløb og den høje sandsynlighed for transmission af HCV-infektion er diagnose i de tidlige stadier af patologi af stor betydning. Den mest nøjagtige formulering af polymerasekædereaktionen overvejes. I modsætning til metoder til påvisning af serologiske markører afhænger PCR kun lidt af ledsagende sygdomme og den generelle tilstand af patientens krop. Men hvis hepatitis C-virus bekræftes, kræves en kvantitativ analyse, hvis afkodning udføres af en læge..

HCV er en alvorlig sygdom, der kræver alvorlige, dyre og farlige bivirkninger af behandlingen. Derfor stilles diagnosen aldrig baseret på resultaterne af en enkelt undersøgelse. Hvis du har mistanke om en virussygdom, skal patienten gennemgå flere tests. Men for at undgå unødvendige omkostninger og tidstab udføres blodprøver og instrumentelle undersøgelser i etaper.

De vigtigste faser af diagnosticeringsprocessen er vist i tabellen:

  • Analysefunktioner
  • Hvordan man forbereder sig
  • Afkodning
  • Fordele
Forskning i gangImplementeringsmål
Biokemisk blodprøve og leverfunktionstestGiver dig mulighed for at vurdere leverens funktionelle aktivitet, niveauet af bilirubin, indikatorer for levertransaminaser. Overskridelse af normen to gange eller mere indikerer tilstedeværelsen af ​​en sygdom
Kliniske test af blod, urin og afføringDisse undersøgelser er ikke-specifikke, men ifølge resultaterne er det muligt at fastslå tilstedeværelsen af ​​en inflammatorisk proces for at vurdere patientens generelle tilstand. Påvisning af bilirubin i urinen, en ændring i afføringens skygge taler for leverskader
Immunoanalyse (ELISA)Giver dig mulighed for at bestemme tilstedeværelsen af ​​en virusinfektion i kroppen og dens form (akut eller kronisk). Ulempen ved undersøgelsen er sandsynligheden for falske resultater
Polymerase kædereaktionDyrt, vanskeligt at udføre, men samtidig den mest nøjagtige metode til diagnosticering af HCV. Giver dig mulighed for at bekræfte tilstedeværelsen af ​​virussen i den menneskelige krop, kvantitativt at etablere niveauet af RNA-kopier for at bestemme HCV-genotypen
Instrumental undersøgelse af leverenDet er nødvendigt at gennemføre en ultralyd af maveorganerne, etablere fibrosestadiet, vurdere sværhedsgraden af ​​skrumpelever, udelukke hepatocellulært carcinom

Lægen stiller kun den endelige diagnose i henhold til de resultater, der er angivet i alle undersøgelser. Nogle lægemidler, for eksempel hepatoprotektorer, vitaminer vises i begyndelsen af ​​den diagnostiske proces. Men målrettede antivirale lægemidler ordineres efter modtagelse af alle data..

Hvad er PCR

Teknikken til polymerasekædereaktion har været kendt i lang tid og er blevet anvendt med succes til at diagnosticere et antal virussygdomme, og HCV er ingen undtagelse..

I øjeblikket er der flere metoder til opsætning af PCR, men i princippet består denne proces af flere faser:

  1. Ødelæggelse af dobbelt streng DNA på grund af varme eller visse kemikalier.
  2. Vedhæftning til det baseseparerede DNA fra de såkaldte primere - resterne af nukleotidkæden af ​​viruset RNA (i de fleste moderne testsystemer anvendes 5'-NTR-regionerne i HCV-genomet).
  3. Et specifikt enzym, DNA-polymerase, genkender en primer, fremkalder binding af andre nukleotidrester.

Ved afslutningen af ​​det tredje trin af polymerasekædereaktionen fordobles DNA'et mellem de to primere, og efterfølgende amplificeres genomområdet eksponentielt (2-4-8 osv.).

Følsomheden af ​​moderne testsystemer er 10-50 kopier af RNA i 1 ml blod.

Afkodning af PCR for hepatitis C skal udføres af en kvalificeret specialist. I overensstemmelse med WHO's internationale standard for kvantitativ bestemmelse af virusgenomet anvendes en frysetørret blodplasmaprøve indeholdende RNA af den første genotype af virussen i en koncentration på 105 IE / ml..

Samtidig lægges der vægt på de kvantitative enheder, hvor forskningsresultaterne udtrykkes. Typisk er kopienummeret af HCV RNA angivet i absolutte eller logaritmiske termer. I overensstemmelse med internationale standarder konverteres dette tal derefter ved hjælp af en speciel koefficient til internationale enheder (IU). Slutresultaterne er således angivet i IU / ml..

For at udføre en kvantitativ undersøgelse anvendes forskellige testsystemer og metoder til opsætning af en polymerasekædereaktion. Nogle er designet til at måle plasma- eller serumviræmi. Andre er mere effektive og indikerer fuldblod.

Det er ikke helt korrekt at tale om normen, når man fortolker de resultater, der er angivet i laboratorieformen. Faktum er, at hos en sund person er virusets RNA fraværende i kroppen, og tilstedeværelsen af ​​HCV-partikler, uanset den kvantitative indikator, indikerer infektion. Desuden vurderes effektiviteten af ​​behandlingen ved hjælp af PCR. Med et negativt resultat efter 4 ugers indtagelse af medicin og derefter efter afslutningen af ​​antiviral behandling (i 48 uger) taler de om bedring.

Undersøgelsestyper

Polymerasekædereaktionen involverer ikke kun bestemmelse af tilstedeværelsen af ​​HCV-RNA i blodet, men også bestemmelse af antallet af kopier af virussen og analyse af genomets struktur. Sådanne muligheder gør PCR til en af ​​de mest informative og nøjagtige metoder til diagnosticering af viral hepatitis C.

Alle de metoder, der anvendes i praksis til at indstille polymerasekædereaktionen, er angivet nedenfor i rækkefølgen af ​​udførelsen (hver efterfølgende test er ordineret med et positivt resultat af den foregående):

  1. PCR-analyse for hepatitis C er af høj kvalitet, den udføres kun for at detektere virusets RNA i blodet.
  2. Kvantitativ PCR-undersøgelse. Dekryptering udføres i overensstemmelse med almindeligt accepterede standarder. Den virologiske belastning kan være lav, moderat eller høj afhængigt af resultatet. Denne indikator er en af ​​forudsigerne for resultatet af HCV-behandling..
  3. Genotypebestemmelse (i mange private laboratorier tilbydes det i kombination med kvantitativ analyse, hvilket reducerer de samlede omkostninger). HCV-genotypen er betegnet med et af de arabiske tal (fra 1 til 6). På Ruslands territorium opdages genotype 1 eller 3 oftere, lidt sjældnere - 2, 4-6 diagnosticeres i isolerede tilfælde. Tidligere, når der blev anvendt interferonregimer, bestemte HCV-typen varigheden og effektiviteten af ​​behandlingen. Moderne antivirale midler har et bredt spektrum af virkning, men nogle af dem ordineres kun til 1-4 HCV-genotyper.

Genotypebestemmelse udføres kun en gang, inden behandlingen påbegyndes. Efterhånden som medicinen tages, er der brug for kvantitative normer for hepatitis C af lægen for at vurdere effektiviteten af ​​antivirale lægemidler. Efter afslutningen af ​​behandlingsforløbet udføres en kvalitativ PCR-undersøgelse.

Funktioner i kvantitativ analyse

Kvantitativ PCR-analyse udføres for at bestemme viral belastning. Dette udtryk betyder antallet af kopier af patogenet RNA i 1 ml blod.

Takket være sådan forskning vil lægen være i stand til at vurdere en række faktorer, der spiller en nøglerolle i løbet af selve sygdommen og resultatet af behandlingen. Det:

  • sandsynligheden for komplikationer (skrumpelever og hepatocellulært carcinom), da jo mere aktiv den patologiske proces er, jo højere er risikoen for leverpatologier allerede i de indledende faser af hepatitis C;
  • effektiviteten af ​​standardbehandlingsregimen (i alvorlige tilfælde kræves yderligere recept på antivirale midler);
  • risiko for andre (især hvis patienten tilhører socialt velstående dele af befolkningen, har en familie, børn);
  • risikoen for ekstrahepatiske komplikationer (udvikling af autoimmune sygdomme, skade på nervesystemet, det kardiovaskulære system osv.).

Kvantificering af HCV RNA er også vigtig for overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen. Når du fortsætter med at tage antivirale lægemidler, falder antallet af opnåede. Målet med terapi er at opnå et negativt resultat af en kvalitativ analyse ved hjælp af PCR-metoden..

Indikationer

Før fremkomsten af ​​et stort antal private laboratorier, hvor en patient kan passere næsten enhver analyse uden et doktors dokument, blev der henvist til kvantitativ PCR på et bestemt stadium af diagnose eller behandling..

I overensstemmelse med WHOs normer og protokoller er indikationer for en sådan undersøgelse:

  • positive serologiske markører af HCV (anti-HCV Total, tilstedeværelsen af ​​klasse G og / eller M immunoglobuliner);
  • positivt resultat af høj kvalitet PCR;
  • kontrol af behandlingen.

Hvis det ønskes, kan patienten uafhængigt henvende sig til en privat klinik og udføre en lignende undersøgelse. Men i mangel af hepatitis C betragtes en sådan laboratorietest som upassende..

Hvad er stadierne af sygdommen

For at bestemme viral belastning fastlægges følgende datoer:

  • inden behandling startes (muligvis samtidig med genotypebestemmelse);
  • 4 ugers behandling (negative data indikerer en hurtig virologisk respons og er forudsigere for et gunstigt resultat);
  • den sidste uge af det terapeutiske forløb (12 eller 24, afhængigt af det valgte skema), bekræfter et negativt resultat effektiviteten af ​​behandlingen, en positiv kræver fortsættelse af behandlingen, men med brugen af ​​andre lægemidler;
  • 24 og 48 uger efter afslutningen af ​​behandlingsforløbet (uanset varighed) bekræfter fraværet af viral belastning bedring.

Derudover udføres undersøgelsen kun i henhold til indikationer (for eksempel sundhedsforringelse, fejl i at tage piller, identifikation af samtidige infektioner osv.). Udførelse af PCR udelukker ikke behovet for andre tests - kliniske studier af blod og urin, leverprøver, ultralyd og andre.

Sådan forbereder du dig til studiet

For at afkodningen af ​​PCR-analysen ikke er fejlagtig, er det nødvendigt at forberede sig korrekt til blodprøveudtagning. Med nogle få undtagelser adskiller reglerne sig ikke fra reglerne i andre undersøgelser..

Er det nødvendigt:

  • doner blod strengt på tom mave (sidste måltid 12 timer før du besøger laboratoriet)
  • proceduren skal udføres om morgenen (så tidligt som muligt);
  • på analysedagen, efter du er vågnet, kan du kun drikke vand; te, kaffe, kulsyreholdige og / eller sukkerholdige drikkevarer, juice osv. kontraindiceret
  • ikke ryge 3-5 timer før du donerer blod;
  • hvis det er umuligt at afbryde indtagelsen af ​​medicin, skal du informere laboratorieassistenten og den læge, der vil fortolke de opnåede data.

Tilstedeværelsen af ​​hepatitis C indebærer allerede en fuldstændig afvisning af alkohol og en streng diæt (tabel nummer 5). Men hvis analysen udføres på det diagnostiske stadium, 5-7 dage før blodprøvetagning, ernæringskontrol med undtagelse af fødevarer og alkohol, der er tung for leveren.

Afkodning af den kvantitative analyse for hepatitis C

Normalt, når patienten modtager testresultaterne i hænderne, viser formularen normindikatorer, de opnåede værdier og en kort fortolkning. Afkodning af en blodprøve for hepatitis C bør dog kun foretages af en læge. Kvantitativ PCR er et af de diagnostiske stadier, så lægen sammenligner de angivne tal med de tidligere opnåede resultater.

Afhængig af de opnåede indikatorer bestemmes graden af ​​virusbelastning eller det fuldstændige fravær af HCV-RNA i kroppen.

Hvis der er udført en kvantitativ analyse for hepatitis C, udføres afkodning i overensstemmelse med tabellen:

IndikatorværdiViral belastning
RNA-virus blev ikke påvist (eller antallet af kopier er mindre end testsystemets følsomhed)Normalt er personen sund, eller analysen blev udført i patologiens inkubationsperiode
1,8 x 102-7,9 x 105 IE / mlLav viral belastning. Angiver nylig infektion, ventetid eller virkning af antivirale lægemidler
8 × 102-2,3 × 107 IE / mlModerat viral belastning. Normalt set i kronisk HCV. Prognosen for behandlingen er gunstig underlagt lægens anbefalinger
2,4 × 107 IE / ml og deroverHøj viræmi. Alvorlige komplikationer er meget sandsynlige (op til leverkræft)

For nøjagtigt at fortolke analysen og forhindre fejlagtige resultater er det kun muligt at evaluere data for kvantitativ PCR efter identifikation af serologiske markører for kvalitativ PCR. Når ELISA skal angive koefficienten for positivitet. Tag også hensyn til dataene fra ultralydsundersøgelse, elastografi og biopsi, hvis undersøgelsen blev udført.

Norm

Kvantitativ PCR-analyse udføres kun, hvis andre blodparametre er positive for hepatitis C.

Det er muligt at få et negativt resultat, når:

  • selvgendannelse (i den medicinske litteratur leveres statistikker, ifølge hvilke ca. 15% af tilfældene med HCV-infektion går ubemærket hen, det humane immunsystem eliminerer virussen fuldstændigt);
  • tidlig virologisk respons (ved evaluering af resultaterne under antiviral terapi);
  • med fejlagtige data fra tidligere undersøgelser (usandsynligt, da ELISA, høj kvalitet PCR, leverfunktionstest normalt er ordineret).

Når der foretages en analyse for hepatitis C for at vurdere den virologiske belastning, udføres afkodningen af ​​en læge. Det menes, at de normale indikatorer er det fuldstændige fravær af HCV-RNA i blodet. Men for at udelukke en latent infektion anbefales det, at undersøgelsen gentages efter et par uger..

Hvilke blodtællinger indikerer hepatitis C

Før du starter en diagnostisk test, skal du vide nøjagtigt, hvad blodtællinger indikerer HCV. På den ene side vil dette give patienten mulighed for at undgå unødvendige økonomiske udgifter til unødvendige tests, på den anden side vil det spare tid.

Så med hepatitis C er følgende data vejledende:

  • positiv ELISA uanset den påviste klasse af antistoffer; men denne parameter vurderes på baggrund af andre resultater, da nogle af immunsystemets egenskaber kan påvirke nøjagtigheden af ​​undersøgelsen;
  • positiv kvalitativ PCR (følsomhed og specificitet af metoden når 100%);
  • bestemmelse af antallet af viruskopier ved kvantitativ PCR.

Indirekte tegn på HCV er overskuddet af levertransaminaser, bilirubin, leukocytose, accelereret ESR, tilstedeværelsen af ​​bilirubin i urinen.

Ved fortolkning af resultaterne tages der hensyn til forkortelser som angivet af hepatitis C i analyserne. Viral belastning er normalt angivet i IU / ml eller IU / ml, og virusets RNA er den engelske forkortelse RNA HCV.

Er der en falsk test

I modsætning til ELISA er sandsynligheden for et falsk PCR-resultat praktisk talt nul. Fejl er kun mulige som et resultat af den menneskelige faktor, det vil sige i tilfælde af overtrædelse af reglerne for blodprøvetagning, opbevaring af prøver og direkte forskning.

Fordele ved kvantitativ PCR-test

Eksperter inden for hepatologi understreger, at kvantitativ PCR er uden sidestykke og er en af ​​hovedundersøgelserne for patienter med HCV. Analysemekanismen minimerer sandsynligheden for falske positive eller falske negative resultater.

Det tager flere dage at få resultater. Blodprøvetagning kræver ikke særlig forberedelse, er mulig i næsten ethvert klinisk laboratorium og ledsages ikke af nogen signifikant smerte. Men den største fordel ved en sådan analyse er høj nøjagtighed og når 100%.

Afkodning af en kvantitativ blodprøve for hepatitis C

Hvis hepatitis C-virus diagnosticeres, kræves der en kvantitativ analyse, hvis afkodning påvirker formålet med behandlingsregimet. I modsætning til genotypebestemmelse udføres en sådan undersøgelse flere gange: direkte på tidspunktet for omfattende diagnose af sygdommen og under behandlingen. Det er vigtigt for lægen at kende det kvantitative indhold af virussen i patientens blod for at ordinere tilstrækkelig behandling.

Allerede på terapistadiet er en blodprøve for HCV-niveauer beregnet til at vurdere effektiviteten af ​​de indtagne lægemidler. Ifølge kliniske undersøgelser viser den kvantitative test et negativt resultat så tidligt som 21-28 dage på baggrund af det overvældende flertal af direktevirkende antivirale lægemidler. Vi taler imidlertid om fuldstændig bedring, hvis negative data fortsætter i to år fra den sidste dag, hvor du tager målrettede piller..

  • Analyseegenskaber
  • Hvordan man forbereder sig
  • Afkodning
  • Test fordele

For at fastslå den numeriske værdi af genomet af det forårsagende middel til hepatitis C i blodserumet anvendes normalt molekylær PCR-teknologi. Dette er den eneste måde til nøjagtigt at beregne niveauet af viræmi: dette udtryk angiver koncentrationen af ​​kopier (genompartikler) af det forårsagende middel til hepatitis C i en bestemt enhed af blod. Andre metoder, for eksempel påvisning af kerneantigenet ved hjælp af et enzymimmunassay, anvendes meget sjældnere på grund af de høje økonomiske omkostninger og vanskelighederne ved den tekniske gennemførelse af undersøgelsen.

Laboratorietest efter PCR-metode

Indtil for nylig var polymerasekædereaktionen kun en eksperimentel analysemetode og var ikke udbredt i klinisk praksis. Princippet for teknikken er baseret på den såkaldte amplifikation - evnen hos en bestemt del af patogengenet til at blive kopieret mange gange..

Dette opnås ved hjælp af de obligatoriske komponenter i PCR-ydeevne:

  • primer, hvis struktur næsten er identisk med visse regioner af HCV-RNA,
  • et enzym, der tilvejebringer en amplifikationsreaktion.

Selve processen med laboratorieforskning finder sted i en bufferopløsning, der indeholder en fast kombination af kationer og anioner. Det er således muligt at opretholde det optimale pH-niveau for PCR. PCR-kittet indeholder også proteiner, der bruges som en slags "byggemateriale" til amplifikation.

Primerens struktur er sådan, at den kun kan interagere med et strengt defineret patogen. PCR-analysens specificitet er baseret på dette princip. Hvis enzymimmunoassay serologiske tests afhænger af de individuelle parametre i det humane immunsystem, er PCR udelukkende rettet mod at identificere RNA fra patogenet til HCV.

Et andet træk ved en sådan undersøgelse er, at afkodning af PCR for hepatitis C er mulig både ved hjælp af computerprogrammer (normalt brugt når det er nødvendigt kvantitativt at fastslå virusets indhold i blodet) og mikroskopiske metoder. Normalt har en sund person med hensyn til viral leverskade ikke et patogen i blodet. PCR-påvisning af HCV-patogenet, hvad enten det er kvalitativt eller kvantitativt, indikerer tydeligt infektion.

Typer af test

Ved hjælp af PCR er det ikke kun muligt at bestemme viræmi, det vil sige det faktiske niveau af patogenet i blodbanen, men også virusets genotype. Alle tilgængelige undersøgelser udført ved hjælp af denne teknik er vist i tabellen.

Liste over testsKort beskrivelse
Kvalitativ PCR-analyse for hepatitis CDesignet til at bekræfte resultaterne af en serologisk test (ELISA). De anvendte testsystemer kan kun detektere patogenets RNA uden at bestemme dets indhold
PCR-analyse af det virale indhold af patologipatogenetUndersøgelsens følsomhed er 5-10 IE / ml. Af hensyn til afkodningen anvendes en universel parameter, da forskellige fejl kan forekomme ved bestemmelse af antallet af kopier. Undersøgelsen er obligatorisk og kan hverken erstatte en PCR-test af høj kvalitet eller genotypebestemmelse
GenotypebestemmelseUnder undersøgelsen bestemmes sekvensen af ​​proteiner, der bestemmer typen af ​​patogen af ​​hepatitis C. I øjeblikket er der etableret 6 genotyper, og næsten hver enkelt kræver en individuel tilgang til terapi.

For hepatitis C udføres alle tre PCR-tests. Diagnostisk algoritme er som følger:

  1. Generelle kliniske undersøgelser ("standardsæt" - blod-, urin-, biokemi- og leverfunktionstest), desuden kan reumatoidtest og en række andre tests ordineres, hvis der er mistanke om autoimmune processer;
  2. Serologisk test (ELISA) til påvisning af antistoffer mod det forårsagende middel til hepatitis C. Initialt vist er Anti-HCV Total test.
  3. PCR af høj kvalitet, designet til at bekræfte ELISA-resultater.
  4. Kvantitativ PCR udført med en bekræftet diagnose af HCV-infektion.
  5. Genotypebestemmelse udføres også, når infektionsfaktoren er fastslået.

Hvis en person ønsker at blive testet uafhængigt for hepatitis C, anbefales det at tage en ELISA. Yderligere undersøgelser udføres afhængigt af de opnåede resultater. Hvis ELISA er negativ, og personen ikke fremsætter nogen klager, testes de igen efter et år. Men hvis der er symptomer på patologi (herunder ikke-specifikke, for eksempel alvorlig svaghed, træthed, smerter i det rigtige hypokondrium), skal du bestå en PCR af høj kvalitet.

Kvantitative analysekarakteristika

Generelt er PCR-teknikken stort set den samme for både kvalitative og kvantitative studier. En prøve af biologisk materiale blandes med en testopløsning, der indeholder specielle forbindelser. Deres rolle er at stimulere opdeling af patogenets RNA (desuden patogenets strengt specifikke genetiske materiale).

Som et resultat når koncentrationen af ​​HCV laboratorieniveauet. På dette stadium er en kvalitativ analyse mulig. Efter komplekse beregninger (normalt bruges computerprogrammer til disse formål) etableres imidlertid en kvantitativ indikator for HCV-indholdet. Derefter overføres det opnåede resultat til internationale enheder og registreres i laboratorieform..

I nogle tilfælde anvendes andre teknikker i stedet for PCR - forgrenet DNA og transkriptionel amplifikation. Men på grund af kompleksiteten af ​​implementeringen og lavere følsomhed foretrækker de fleste specialister at identificere de kvantitative normer for hepatitis C ved hjælp af PCR..

Indikationer

Nu, i næsten ethvert privat laboratorium, kan en patient undersøges uden papirer eller henvisninger fra en terapeut. Kvantificering af hepatitis C-virus i blod er ingen undtagelse. Spørgsmålet er, hvornår anbefales det at tage testen?

Hepatologer anbefaler at gennemføre en undersøgelse i sådanne tilfælde:

  • positiv ELISA + positiv PCR;
  • negativ ELISA + positiv PCR.

Derudover er den kvantitative bestemmelse af HCV blevet vist i løbet af antiviral terapi. Lægen sammenligner resultaterne af viræmi opnået inden starten af ​​lægemiddelforløbet med resultaterne af test, der allerede er udført under behandlingen. Normen er negativ PCR efter 12 ugers stofbrug. Og forudsigeren for 100% bedring er fraværet af viræmi efter en måneds behandling.

Testen fortsætter efter afslutningen af ​​behandlingen for at eliminere risikoen for gentagelse. Patienten skal tage denne test i yderligere 2 år. Hvis resultatet er negativt, taler de om bedring. Patienten fjernes fra registeret over en hepatolog eller specialist i infektionssygdomme og giver generelle anbefalinger vedrørende genoprettelse af leveren.

Hvis den kvantitative test for HCV igen er positiv efter 2 år, gentages alle test igen. I dette tilfælde antages reinfektion og muligvis en anden genotype af virussen. Men et nyt behandlingsregime er påkrævet, og sandsynligheden for et vellykket resultat er signifikant lavere.

Hvornår er testen nyttig?

Tidspunktet for kvantificering af virusbelastning ved bekræftet HCV-infektion er vist i tabellen..

Funktioner af sygdomsforløbet og behandlingStadier for levering af kvantitativ analyse
Trin af primær diagnoseViræmi inden start af antivirale lægemidler er en vigtig parameter til bestemmelse af behandling og overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen
4 ugerAnalysen udføres uanset behandlingsregimen og de anvendte lægemidler
12 ugerUndersøgelsen udføres også under alle omstændigheder
24 ugerTest udføres, hvis terapiforløbet varer 24 uger
Uge 48Udføres med et 48-ugers behandlingsforløb (normalt ved brug af interferoner) og som en kontroltest efter 12 ugers behandling
Efter afsluttet terapiforløbMed intervaller på 24 uger i 2 år

Hvordan man forbereder sig

PCR-teknikken i sig selv er mindre følsom over for de særlige egenskaber ved indre organers og immunsystemets funktion. Dette udelukker dog ikke overholdelse af reglerne for forberedelse til testen. I de fleste tilfælde udføres en kvantitativ test med en allerede bekræftet diagnose af hepatitis C.

Dette indebærer i det mindste afslag fra alkohol og overholdelse af en streng diæt (i henhold til tabel nr. 5 eller nr. 5a afhængigt af sværhedsgraden af ​​patientens tilstand). Den behandlende læge er allerede bekendt med historien, ved, hvilke lægemidler patienten tager, og fra hvilke patologier han lider. Dette gør det lettere at dechifrere PCR-analysen og reducerer sandsynligheden for fejldiagnose.

Men for at få det mest nøjagtige resultat, du har brug for:

  • doner blod på tom mave (efter middagen skal der gå mindst 12 timer, morgenmaden er kontraindiceret);
  • du skal besøge laboratoriet om morgenen;
  • inden du donerer blod, bør du ikke spise eller drikke andet end vand;
  • ryger ikke 8-10 timer før undersøgelsen.

De anførte regler skal følges før hver test for kvantitativt patogenindhold. Hvis testen udføres efter behandling, og lægen har tilladt svækkelse i kosten 7-10 dage før test, skal du vende tilbage til den strenge diæt. Når det kommer til alkohol, er der restriktioner i hele livet..

Afkodning af en kvantitativ blodprøve for hepatitis C

Tidligere delte indenlandske eksperter viræmi i flere grupper: meget lav, lav, moderat, høj og meget høj. Men på nuværende tidspunkt udføres afkodning af en blodprøve for hepatitis C i overensstemmelse med internationale standarder. Nu er viræmi kun opdelt i 2 grupper. Tabellen viser de sandsynlige data for en kvantitativ analyse for hepatitis C (den endelige afkodning, uanset indikatorerne, skal udføres af en læge).

Test resultaterViral belastning
7,9 × 105 IE / ml og derunderLav viræmi
7,9 × 105 IE / ml og deroverHøj viral belastning
HCV ikke detekteretPatogenets RNA-niveau er under tærsklen bestemt af testsystemet (normalt 5-10 IE / ml) eller er helt fraværende. Viræmi er negativ

Men kun en specialist kan kompetent dechifrere en kvantitativ undersøgelse for HCV og skelne normal fra kritiske indikatorer, hvilket indikerer manglende resultat fra antiviral terapi eller et tilbagefald af infektion. Alle tests skal arkiveres på et ambulant kort, så lægen har fuldstændige oplysninger om aktiviteten af ​​virusinfektionen og reaktionen på at tage målrettet medicin..

Indikatorer for normen

Indikatorer for normen ved afkodning af en kvantitativ analyse for hepatitis C er kun, når PCR-resultatet er negativt, dvs. der er ikke taget noget virus-RNA i blodprøven. I andre tilfælde indikerer tilstedeværelsen af ​​et patogen infektion.

Ved bekræftelse af diagnosen tjener kvantitative blodparametre i hepatitis C som grundlag for vurdering af virussprocesens aktivitetsgrad. Høj viræmi øger sandsynligheden for komplikationer og forkorter starten på irreversible ændringer i leveren.

Virologisk belastning på mere end 800.000 IE / ml er grundlaget for en række instrumentelle undersøgelser:

  • elastografi - en diagnostisk metode til at bestemme graden af ​​fibrose (spredning og størrelse af bindevævsspænding);
  • tomografi - en detaljeret røntgenundersøgelse for at udelukke eller bekræfte tilstedeværelsen af ​​ondartede eller godartede neoplasmer;
  • leverbiopsi, som giver den mest komplette information om strukturelle ændringer i organet.

En lav viral belastning indikerer en langsomt udviklende virusinfektion. Denne proces udelukker ikke udviklingen af ​​leverskader, men sandsynligheden for svær dekompenseret skrumpelever eller hepatocellulært carcinom er lav. I denne kategori af patienter forekommer sjældent ekstrahepatiske manifestationer af hepatitis C (kardiovaskulære lidelser, autoimmune lidelser), hvilket også øger chancerne for ikke kun en vellykket antiviral behandling, men også en hurtig generel bedring..

Hvilke blodtal tæller infektion

Når der stilles en diagnose, ordineres flere undersøgelser, så en testfejl er udelukket.

De vigtigste markører for hepatitis C er:

  1. Positivt resultat af enzymimmunanalyse. Men ELISA afhænger i vid udstrækning af tilstanden af ​​det humane immunsystem, og derfor er et falsk-positivt eller falsk-negativt resultat på tidspunktet for den primære diagnose ikke udelukket..
  2. Positivitetsgraden for hepatitis C er højere end 1. Beregnet af antistoftiteren. Undertiden kan referenceværdierne variere afhængigt af det anvendte testsystem, men den fysiologiske norm er altid angivet på resultatformularen.
  3. Positivt resultat af en kvalitativ PCR-test. Påvisning af RNA af det forårsagende middel til patologien indikerer entydigt infektion.
  4. Viræmi detekterbar ved kvantitativ PCR.

Indirekte laboratorietegn på hepatitis C er:

  • øgede niveauer af leverenzymer, bilirubin;
  • ændring i niveauet af lymfocytter, i nogle tilfælde leukocytter, acceleration af ESR.

Men når man besvarer spørgsmålet om, hvilke blodtal der indikerer hepatitis C, styres lægerne af resultaterne af PCR, da ELISA måske ikke er vejledende i nærværelse af visse sygdomme (HIV, autoimmune lidelser). Der er sandsynligvis også forkerte resultater med graviditet ved at tage visse lægemidler. Anamnese spiller også en vigtig rolle..

I hepatitis C påvises antistoffer, såsom RNA, ikke straks ved hjælp af testsystemer, men efter mindst 10-14 dage. ELISA kan give et pålideligt resultat senere - 4-6 uger efter infektion. Derfor, hvis der er alvorlige grunde til at antage kontakt med patientens blod, i tilfælde af et negativt resultat, er det fornuftigt at gentage alle tests efter 1-1,5 måneder.

Er fejlagtige resultater mulige?

I moderne laboratorier udføres test i overensstemmelse med alle standarder (i overensstemmelse med kravene i indenlandsk og udenlandsk lovgivning), men muligheden for fejl og falske resultater kan ikke udelukkes.

Hvis udførelsen af ​​ELISA er påvirket af det humane immunsystems tilstand, afhænger rigtigheden af ​​PCR af:

  • opretholdelse af sterilitet under indsamling, transport og håndtering af patientens blodprøver for at udelukke mulig kontakt med forurenede prøver;
  • overholdelse af temperaturregimet og andre regler under opbevaring og transport af reagensglas med blod
  • korrektheden af ​​PCR-opsætningen (fra laboratorieassistentens arbejde til automatiske diagnosesystemers funktion)
  • kvaliteten af ​​de anvendte laboratoriematerialer.

Men kvantitativ analyse udføres på basis af allerede udførte undersøgelser, der tydeligt indikerer tilstedeværelsen af ​​HCV (ELISA og kvalitativ PCR). Derfor, hvis resultatet er negativt på baggrund af en bekræftet diagnose, gentages undersøgelsen. Derudover skal du være opmærksom på, hvordan hepatitis C er angivet i analyserne.

Nogle klinikker bruger muligvis et forældet system, når viræmi ikke er angivet i internationale enheder, men i antal kopier. Nogle gange opstår forvirring med at tælle nuller i bestemte tal. Derfor skal lægen behandle afkodningen af ​​betegnelserne i resultatformularen..

Fordele ved en kvantitativ test

Bestemmelse af viral belastning er mulig ved hjælp af andre metoder, herunder serologisk. Så undersøgelsen for kerneantigenet betragtes som et alternativ til kvantitativ PCR.

Men de fleste læger foretrækker PCR på grund af:

  • tilgængeligheden og kvaliteten af ​​testsystemer: de produceres af verdens førende farmaceutiske og medicinske teknologifirmaer
  • hurtig og nem implementering
  • høj følsomhed: moderne PCR-teknikker kan detektere patogen-RNA i en mængde på 5 IE / ml;
  • universalitet: kvantitativ bestemmelse udføres ved hjælp af de samme metoder, uanset HCV-genotypen;
  • objektivitet uanset patientens sundhedsstatus (i modsætning til ELISA), som muliggør forskning på forskellige stadier af diagnose og behandling;
  • ingen effekt på resultaterne af medicin, der tages.

PCR er fortsat den primære metode til kvantificering af viræmi. Testen bruges universelt i næsten alle laboratorier og hospitaler. Men for at undgå fejl, inden du består analysen, skal du spørge, hvilken teknologi der vil blive brugt til undersøgelsen for at korrelere resultaterne af yderligere analyser.

Test for hepatitis C: indikationer, typer, afkodning

Hepatitis C er skade på levervæv på grund af en inflammatorisk proces forårsaget af en RNA-virus. Denne type virus blev først identificeret i 1988.

Sygdommen kan forløbe i en akut eller kronisk form, men oftere er den karakteriseret ved et langt latent, dvs. asymptomatisk forløb. Tendensen til kronisk sygdom skyldes patogenets evne til at mutere. På grund af dannelsen af ​​mutante stammer undgår HCV-virussen immuntilsyn og forbliver i kroppen i lang tid uden at forårsage udtalte symptomer på sygdommen.

HCV-antigener har en lav evne til at inducere immunrespons, så tidlige antistoffer mod dem vises kun 4-8 uger efter sygdommens indtræden, undertiden endda senere, antistoftitre er lave - dette komplicerer tidlig diagnose af sygdommen.

Den langvarige inflammatoriske proces forårsaget af HCV forårsager ødelæggelse af levervæv. Processen er skjult på grund af leverens kompenserende kapacitet. Gradvist tømmes de, og der vises tegn på leverdysfunktion, normalt indikerer dette dens dybe skade. Opgaven med analysen for hepatitis C er at identificere sygdommen på det latente stadium og starte behandlingen så tidligt som muligt.

Indikationer for henvisning til test for hepatitis C

Test for hepatitis C udføres af følgende årsager:

  • undersøgelse af personer, der har haft kontakt med inficerede
  • diagnose af hepatitis blandet etiologi;
  • overvågning af effektiviteten af ​​behandlingen
  • levercirrose;
  • forebyggende medicinsk undersøgelse af sundhedsarbejdere, ansatte i førskoleinstitutioner osv..

Patienten kan henvises til analyse, hvis der er tegn på leverskade:

  • forstørret lever, smerter i højre hypokondrium;
  • gulhed af huden og det hvide i øjnene, kløe;
  • forstørrelse af milten, vaskulære "edderkopper".

Typer af test for hepatitis C

Til diagnosticering af hepatitis C bruges både direkte isolering af virussen i blodet og identifikation af indirekte tegn på dets tilstedeværelse i kroppen - de såkaldte markører -. Derudover undersøges lever- og miltfunktioner..

Markører for hepatitis C - samlede antistoffer mod HCV-virus (Ig M + IgG). Den første (i den fjerde til sjette infektionsuge) IgM-antistoffer begynder at dannes. Efter 1,5-2 måneder begynder produktionen af ​​IgG-antistoffer, deres koncentration når maksimalt fra 3 til 6 måneder af sygdommen. Denne type antistof kan findes i serum i årevis. Derfor gør detektion af totale antistoffer det muligt at diagnosticere hepatitis C startende fra 3. uge efter infektion..

Overførsel af hepatitis C-virus sker ved tæt kontakt med en virusbærer eller indtagelse af inficeret blod.

Antistoffer mod HCV bestemmes ved hjælp af enzymbundet immunosorbentassay (ELISA) - en ultralydsensitiv test, der ofte bruges som en hurtig diagnostisk.

For at bestemme virusets RNA i blodserumet anvendes fremgangsmåden til polymerasekædereaktion (PCR). Dette er hovedtesten til at fastslå diagnosen hepatitis C. PCR er en kvalitativ test, hvor kun tilstedeværelsen af ​​virussen i blodet bestemmes, men ikke dens mængde.

Bestemmelse af niveauet af antistoffer HCVcor IgG NS3-NS5 er nødvendig for at udelukke eller bekræfte diagnosen i nærvær af et negativt PCR-resultat.

For at diagnosticere leverfunktioner ordineres leverprøver - bestemmelse af ALT (alaninaminotransferase), AST (aspartataminotransferase), bilirubin, alkalisk phosphatase, GGT (gamma-glutamyltransferase), thymol-test. Deres indikatorer sammenlignes med normtabeller, en omfattende vurdering af resultaterne er vigtig.

Et obligatorisk stadium af diagnosen er en blodprøve med bestemmelse af leukocytformlen og blodpladerne. Med hepatitis C afslører en generel blodprøve et normalt eller reduceret antal leukocytter, lymfocytose, et fald i ESR og en biokemisk blodprøve - hyperbilirubinæmi på grund af en direkte fraktion, en stigning i ALT-aktivitet og forstyrrelser i proteinmetabolisme. I den indledende periode med hepatitis øges også aktiviteten af ​​nogle stoffer, der normalt er indeholdt i hepatocytter og kommer ind i blodet i meget små mængder - sorbitol dehydrogenase, ornithinecarbamoyltransferase, fruktose-1-phosphataldolase.

Generel urinanalyse med sedimentmikroskopi vil påvise urobilin i urinen og bilirubin i de senere stadier af sygdommen.

En hardwareundersøgelse af abdominale organer, herunder leveren, udføres - ultralyd, beregnet eller magnetisk nuklear tomografi.

Hepatitis C-virus spredes ikke ved at ryste hænder, kysse og de fleste husholdningsartikler såsom fælles redskaber.

En vigtig metode til diagnosticering af hepatitis C er morfologisk undersøgelse af leverbiopsi. Det supplerer ikke kun dataene fra biokemiske, immunologiske og apparaturstudier, men angiver også ofte arten og stadiet af den patologiske proces, som andre metoder ikke opdager. Morfologisk forskning er nødvendig for at bestemme indikationerne for interferonbehandling og for at vurdere dens effektivitet. Leverbiopsi er indiceret til alle patienter med hepatitis C- og HBsAg-bærere.

Forberedelse til testen

For at teste for hepatitis C skal du donere blod fra en vene. Hvordan forbereder man sig korrekt til blodprøveudtagning? Er det okay at spise og drikke før analysen?

Analysen tages strengt på tom mave. Der skal gå mindst 8 timer mellem sidste måltid og blodopsamling. Før du tager testen, skal du udelukke fysisk aktivitet, rygning, alkohol, fede og stegte fødevarer, kulsyreholdige drikkevarer. Du kan drikke rent vand. De fleste laboratorier tager kun blod til analyse i første halvdel af dagen, så de donerer blod om morgenen.

Afkodning af resultaterne

Test til bestemmelse af antistoffer mod hepatitisvirus er kvalitativ, dvs. de indikerer tilstedeværelse eller fravær af antistoffer, men bestemmer ikke deres mængde.

Hvis der påvises anti-HCV-antistoffer i serum, ordineres en anden test for at udelukke et falsk positivt resultat. Et positivt svar på re-analyse indikerer tilstedeværelsen af ​​hepatitis C, men skelner ikke mellem akutte og kroniske former.

I fravær af antistoffer mod virussen er reaktionen "negativ". Imidlertid kan fraværet af antistoffer ikke udelukke infektion. Svaret vil også være negativt, hvis der er gået mindre end fire uger siden infektionen..

For at diagnosticere hepatitis C, både direkte isolering af virussen i blodet og identifikation af indirekte tegn på dets tilstedeværelse i kroppen - de såkaldte markører.

Kunne analyseresultatet være forkert? Forkert forberedelse til analyse kan føre til falske resultater. Et falsk positivt resultat kan opnås i sådanne tilfælde:

  • forurening af det præsenterede biomateriale;
  • tilstedeværelsen af ​​heparin i blodet
  • tilstedeværelsen af ​​proteinholdige, kemiske stoffer i prøven.

Hvad betyder en positiv hepatitis C-test?

Hepatitis C overføres fra person til person, normalt parenteralt. Hovedoverførselsvejen er gennem forurenet blod såvel som gennem andre biologiske væsker (spyt, urin, sæd). Blodet fra infektionsbærere er farligt, før de viser symptomer på sygdommen og bevarer evnen til at blive smittet i lang tid.

Der er over 180 millioner mennesker i verden smittet med HCV. Der er i øjeblikket ingen vaccine mod hepatitis C, men der er forskning i gang med at udvikle en. Oftest påvises patogenvirussen hos unge i alderen 20-29 år. Den virale hepatitis C-epidemi vokser, og omkring 3-4 millioner mennesker smittes hvert år. Antallet af dødsfald som følge af sygdommens komplikationer er mere end 390 tusind om året.

I nogle populationer er infektionsraterne meget højere. Så i fare er:

  • ofte indlagte patienter
  • patienter, der har behov for kontinuerlig hæmodialyse;
  • blodmodtagere
  • patienter med onkologiske apoteker;
  • organtransplantatmodtagere;
  • professionelle grupper af medicinske arbejdere i direkte kontakt med patienternes blod
  • børn født af inficerede mødre (med høje koncentrationer af virussen i moderen)
  • bærere af HIV;
  • seksuelle partnere for mennesker med hepatitis C;
  • personer i varetægt
  • mennesker, der injicerer stoffer, patienter i lægemiddelmedicin.

En vigtig metode til diagnosticering af hepatitis C er morfologisk undersøgelse af leverbiopsi. Det supplerer ikke kun dataene fra biokemiske, immunologiske og apparaturstudier, men indikerer også ofte arten og stadiet af den patologiske proces.

Overførslen af ​​virussen sker ved tæt kontakt med en virusbærer eller indtagelse af inficeret blod i kroppen. Den seksuelle og lodrette infektionsvej (fra mor til barn) registreres i sjældne tilfælde. Hos 40-50% af patienterne er det ikke muligt at finde den nøjagtige kilde til infektion. Hepatitis C-virus spredes ikke ved at ryste hænder, kysse og de fleste husholdningsartikler såsom fælles redskaber. Men hvis der er en inficeret person i familien, skal du være forsigtig: manikyrforsyninger, en barbermaskine, en tandbørste, vaskeklude kan ikke deles, da de kan have spor af blod.

På tidspunktet for infektion trænger virussen ind i blodbanen og sætter sig i de organer og væv, hvor den formerer sig. Disse er leverceller og mononukleære blodceller. I disse celler formeres patogenet ikke kun, men forbliver også i lang tid..

Derefter beskadiger HCV leverceller (hepatocytter). Det forårsagende middel trænger ind i leverparenkymet, ændrer dets struktur og forstyrrer vitale funktioner. Processen med destruktion af hepatocytter ledsages af spredning af bindevæv og dets udskiftning af leverceller (skrumpelever). Immunsystemet producerer antistoffer mod leverceller, hvilket øger deres skade. Gradvist mister leveren sin evne til at udføre sine funktioner, der udvikles alvorlige komplikationer (skrumpelever, leversvigt, hepatocellulært carcinom).

HCV-antigener har en lav evne til at inducere immunrespons, så tidlige antistoffer mod dem vises kun 4-8 uger efter sygdommens indtræden, undertiden endda senere, antistoftitre er lave - dette komplicerer tidlig diagnose af sygdommen.

Symptomer der kræver test for hepatitis C

Intensiteten af ​​symptomerne på sygdommen afhænger i høj grad af koncentrationen af ​​virussen i blodet, immunsystemets tilstand. Inkubationsperioden er i gennemsnit 3-7 uger. Nogle gange varer denne periode op til 20-26 uger. Den akutte form for sygdommen diagnosticeres sjældent og oftere ved et uheld. I 70% af tilfældene med akut infektion forsvinder sygdommen uden kliniske manifestationer..

Analysen tages strengt på tom mave. Der skal gå mindst 8 timer mellem sidste måltid og blodopsamling. Før du tager testen, skal du udelukke fysisk aktivitet, rygning, alkohol, fede og stegte fødevarer, kulsyreholdige drikkevarer.

Symptomer, der kan indikere akut hepatitis C:

  • generel utilpashed, svaghed, nedsat ydeevne, apati;
  • hovedpine, svimmelhed
  • nedsat appetit, nedsat tolerance over for madmængder;
  • kvalme, dyspepsi;
  • tyngde og ubehag i højre hypokondrium;
  • feber, kulderystelser
  • kløende hud
  • mørkere, skummende urin (urin der ligner øl);
  • led og hjertemuskelskader
  • forstørrelse af lever og milt.

Iterisk farvning af huden kan være fraværende eller vises i kort tid. I omkring 80% af tilfældene er sygdommen anicterisk. Med gulsotens begyndelse falder den enzymatiske aktivitet af levertransaminaser..

Normalt slettes symptomatologien, og patienter lægger ikke meget vægt på kliniske manifestationer, derfor bliver akut hepatitis i mere end 50% af tilfældene kronisk. I sjældne tilfælde kan en akut infektion være alvorlig. En særlig klinisk form for sygdommen - fulminant hepatitis - ledsages af svære autoimmune reaktioner.

Hepatitis C-behandling

Behandlingen udføres af en hepatolog eller specialist i infektionssygdomme. Antivirale lægemidler, immunstimulerende midler ordineres. Varigheden af ​​forløbet, doseringen og indgivelsesregimen afhænger af forløbets form og sygdommens sværhedsgrad, men i gennemsnit varer varigheden af ​​antiviral terapi 12 måneder.